乙肝病毒表面抗原檢測
一(yī)．HBsAg實驗操作(zuò)步驟：
此次征兵(bīng)體(tǐ)檢所采用(yòngλ¶♣)的(de)試劑盒是(shì)英科(kē)新創試劑盒，具體(tǐ)步驟如(r♥"ú)下(xià)：
1. 平衡∞λ$₩：将試劑盒從(cóng)冷(lěng)藏環境中取出，待平衡至室溫後（約半£¶£小(xiǎo)時(shí)），方可(kě)開(kāi)啓 ©₹使用(yòng)。
2. 配洗液：按1：19比例用♣ σ(yòng)蒸餾水(shuǐ)或去(qù)離(l∞€αí)子(zǐ)水(shuǐ)溶解配制(zhì)。
3. 編号：将微(wēi)孔條固定αε☆于支架上(shàng)，按序編号。
4. 加樣：分(fēn)别加入陰、陽≥δ>₽性對(duì)照(zhào)50ul，待測血清樣品50ul于ε'∏相(xiàng)應孔中。陰性對(duì)照€≥¶(zhào)設2孔，陽性對(duì)照(zh&§$☆ào)設2孔（采用(yòng)單波長(cháng)酶标儀時(shí)應™ 設空(kōng)白(bái)對(duì)照(zhào)1孔，即不(bù)加₹β•樣品及酶标記抗體(tǐ)，其餘步驟相(xiàng)同），γα室內(nèi)質控1孔，加量50ul。
5. 加酶：•σ分(fēn)别在每孔中加入酶聯試劑50ul，輕輕混勻©≠δ→。
6. σ←溫育：置37℃溫育60分(fēn)鐘(zhōng)，室溫平λ€♣&衡5分(fēn)鐘(zhōng)。
7. 洗滌：用(yòng)≤¶§>PBST洗滌液充分(fēn)洗滌5次，洗滌完後扣幹（每次應保持30秒(miǎ★φo)～60秒(miǎo)的(de)浸泡時(shí)間(jiān)✔★→）。
8. 顯色：每孔加顯色劑A、B各5φ€0ul，輕輕混勻，暗(àn)置37℃15分(fēn)鐘(zγ©∞hōng)。
9. 終止：每孔加終止液50u₹₩δ♠l，輕輕混勻。
10.測定：用(yòng)酶标儀單波長(cháng)450nm¶←或雙波長(cháng)450nm/630←βΩnm測定各孔OD值(用(yòng)單波長(cháng)測定時♠αΩ∑(shí)需設空(kōng)白(bái)對(duì)照(zhào)一(yī)孔®γ™™，30分(fēn)鐘(zhōng)內(nèi)完"∏☆ 成，并記錄結果)。
11.結果判定：
&nbs↓"€ p; 臨界值(C.O)＝陰性對(duì)照(zhào♥λ↕β)孔OD均值N×2.1
&nb₽←sp; 樣品OD值S/C.O≥1者為(wèi®±↓↑)HBsAg陽性(或S/N≥2.1)
&nb™≈©sp; 樣品OD值S/C.O₹™＜1者為(wèi)HBsAg陰性(或S/N＜2↓<✘.1)
&nλ$bsp; (陰性對(duì)¥∑∑照(zhào)孔OD值大(dà)于0.1時(shí)應重新實驗，小≠¥£©(xiǎo)于0.05時(shí)以0.05計(jì)算(suàn))±£
二、HBsAg檢測中應注意的(de)問(wèn)題
1．實∑♣↔驗前戴好(hǎo)手套，注意檢驗操作(zuò)人(r∏∑én)員(yuán)自(zì)我保護。
2．包被之微(wēi)孔闆從( ×cóng)冰箱取出，應置室溫（18℃～25℃€•©）放(fàng)置20分(fēn)鐘(zhōng)以上(shà×<↑>ng)，使之室溫平衡，潮氣散盡後才能(néng)開(kāi)密封包裝袋↑₽。未使用(yòng)完之微(wēi)孔闆連同幹燥劑應及時(sh≈≤ í)放(fàng)入凹凸封袋中，并封好(hǎo)，即時(shí)存入↓βσε4℃冰箱。
3±．标本若不(bù)能(néng)當天檢測應♣☆★ 及時(shí)分(fēn)離(lí)血清并≥≠™♠編号，存入4℃冰箱，以防溶血。若超過一(σ≈yī)周才檢測的(de)樣本應将血清放(fàng)-20 ℃以下π•(xià)冰箱保存，以防污染或細菌生(shēng)長(chán ±<↔g)所緻效價下(xià)降。
4．加酶試劑應使用(★yòng)定量移液器(qì)加液，以保證加量準 ♠φ§确。
5．溫孵前，應檢查溫箱×α♥的(de)溫度是(shì)否符合要(yào)求。用(yòng)恒溫水(✘→÷shuǐ)浴箱溫孵時(shí)微(wēi)孔闆應漂浮在水(shuǐ)面，不(b↕✔ù)可(kě)脫離(lí)水(shuǐ)面；如(rú)果用✘£(yòng)幹溫孵箱溫育，請(qǐng)将微(wēi)孔闆置于溫度計★ π(jì)附近(jìn)的(de)環境中，保證溫度準确。
6．洗滌是(shì)ELISA操作(zuò)中的(de)重∑♣要(yào)環節，清洗幹淨是(shì)保證質量$♦¥★的(de)關鍵。 手工(gōng)洗滌時(shí)各孔均須加滿洗γφδ液并浸泡 30-60秒(miǎo)，防止孔口內(nèi)™"♦÷有(yǒu)遊離(lí)酶未能(néng)>β↓洗淨；采用(yòng)洗闆機(jī)時(shí)，應™→π注意調節洗液量至孔口。
7．比色前應先用(yòng)柔軟潔淨的(de)吸水(shuǐ β →)紙(zhǐ)拭淨微(wēi)孔闆底附著(zhe)的(de)液體(t§&☆λǐ)或指印，然後将微(wēi)孔闆正确放(fàn£>←g)入酶标儀的(de)比色架中，酶标儀不(bù)應安置在陽光(gu•π¶₽āng)或強光(guāng)照(zhào)射處，使用(yòng)前 ≥≤先預熱(rè)儀器(qì)15分(fēn)鐘(zhōng)，測讀(dβ©£☆ú)的(de)結果更穩定。
8．重視(shì)檢驗結果的(de)計(jì)算(suàn)， 是(shì)保證結果正确的(de)前提，應按試劑盒說(sΩ÷huō)明(míng)書(shū)中的(deπβ)計(jì)算(suàn)公式計(jì)算(suàn)，不(bù)得(de)自♥>©γ(zì)行(xíng)制(zhì)定判定結果标準。
9．所有(yǒu)的(de)樣品及一(yī)次性耗材都(dōu)應按傳染↔₩源消毒處理(lǐ)(包括陰、陽性對(duì)照₽¶(zhào)品)。
三、征兵(bīng)體(tǐ)檢對(duì)HBsAg項目要(yà'÷×∑o)求：
1．要(yào)做(zuò)好(hǎo)室內(nèi)質★♣α控。每次實驗時(shí)，每塊微(wēi)孔闆都(β≈ dōu)應附HBsAg(2IU/ml)質控血清同時(shí)檢測，質控δ"血清檢測結果須有(yǒu)效，否則應重新實驗。
2．實驗報(bào)告單應簽上(shàng)操δ&作(zuò)者姓名，以示負責。做(zuò)好(hǎo)檢驗結果 &±$記錄，兵(bīng)檢結果應專門(mén)登記，并附有(yǒu)酶标儀檢測原♣↓始記錄。
3．檢測完畢的(de)血清或血漿樣本應置-20℃以下(xià)環境保存，λ∞↕留樣6個(gè)月(yuè)。
4．初次檢測陽性結果的(de)标本應進行(xíng)雙孔複檢，複檢結果∞™♣✘為(wèi)陽性，方可(kě)報(bào)告陽性，防止由于污染造成的(de)↔§×↑假陽性。
5．應每天觀察水(shuǐ)浴箱、溫孵箱和(hé)試劑存放(fàng)冰箱α∞的(de)溫度是(shì)否在要(yào)求範圍。
6．實驗操作(zuò)者應堅持原則，忠實于實驗結果，不(bù)★≥得(de)弄虛作(zuò)假。
梅 毒 螺 旋 體(tǐ) 抗 體(tǐ) 檢 測
一(yī)、梅毒螺旋體(tǐ)的(de)抗原性及梅毒螺旋體 £(tǐ)抗體(tǐ)
1．梅毒螺旋體(tǐ)抗原：
通(tōng)常檢測的(de)梅毒抗體(tǐ)有(✘∏yǒu)兩種類型，一(yī)是(shì)梅毒螺旋體(tǐ)的(de)體(tǐ&ε)表蛋白(bái)抗原，為(wèi)蛋白(bá÷£εi)多(duō)糖複合物(wù)，該抗原具有(yǒu)種和(héΩ)型的(de)特異性，為(wèi)特異性抗原，能(néng)同相(xiàng) ∑應抗體(tǐ)發生(shēng)凝集反應；另一 >(yī)是(shì)螺旋體(tǐ)抗原，存在螺旋體(tǐ)內$★ (nèi)部，是(shì)類脂質多(duō)糖複合×☆≠物(wù)，該抗原無種和(hé)型的(de)特異性，為(wèi)非↓λ✘δ特異性抗原，具有(yǒu)廣泛的(de)交叉反應€₩'π，與螺旋體(tǐ)屬中各群之間(jiān)均出現(x♣ εiàn)交叉反應，同螺旋體(tǐ)以外(wài)的(de)病原體(tǐ)β<也(yě)出現(xiàn)交叉反應。
非特異性抗原刺激人(rén)體(tǐ)産生(shēngλ÷× )非特異性抗體(tǐ)，是(shì)一(yī)種✔$抗類脂質抗體(tǐ)稱為(wèi)反應素，該抗體(tǐ)在一(yī ¥$)期梅毒階段即增加，二期梅毒達到(dào)高(gāo)峰，三期梅毒時(s≈€$hí)部分(fēn)會(huì)逐漸降低(dī)。
二、梅毒抗體(tǐ)檢測：
1．特異性抗體(tǐ)檢測：目前主要(yào)有(yǒu)TPHA、φ♣TPPA、TP-ELISA等方法。
2．非特異性抗體(tǐ)檢測：目前多(duō)用(yòng) ÷®TRUST、RPR、USR等方法。
三、TRUST檢測：
本次征兵(bīng)體(tǐ)檢要(yào)求檢測梅毒非特異性抗體(tǐ)，使§≥ε用(yòng)英科(kē)新創（廈門(mén←☆♣)）科(kē)技(jì)有(yǒu)限公司TRUST試驗₹α∑∏盒。此項體(tǐ)檢是(shì)對(duì)定兵(bīng)後的(de)兵(←bīng)員(yuán)進行(xíng)。
1．原理(lǐ)：采用(yòng)類脂質抗原重懸 <≠¶于含有(yǒu)特制(zhì)的(de)甲∑σ♣ 苯胺紅(hóng)溶液中制(zhì)成，類脂質抗原能Ω ∑(néng)與患者血清或血漿中的(de)反應素形成凝集反應£'≥，與甲苯胺紅(hóng)共同形成肉眼可(kě)見σδ∞(jiàn)的(de)凝集顆粒。
2．檢測步驟：
⑴準備：待檢血清或血漿和(hé)TRUST抗原于用(yòng)前置23℃~α↕29℃平衡20分(fēn)鐘(zhōng)；
⑵加樣：取待檢血清或血漿（不(bù)需滅活）50μl和(γ↓hé)陰性及陽性對(duì)照(zhào)各50μl分(fēnε£)别均勻塗滿1個(gè)卡圈內(nèi)；
⑶加抗原試劑：輕輕搖動TRUST抗原使之均勻，以試劑盒中專><β用(yòng)滴管垂直滴加抗原1滴于血清卡圈內(nè≤λ"☆i)；
⑷混旋：用(yòng)梅毒旋轉儀或手工(gōn±↔₩≥g)水(shuǐ)平轉動紙(zhǐ)卡，每分(fēn)鐘(zhōng)10☆π≠↓0轉，轉動8分(fēn)鐘(zhōng)後，立即于♠÷☆光(guāng)線充足處肉眼判定結果，三分(fēn)鐘(zhōng)內(nè∏α₩i)完成；
⑸結果判定：
陽性反應：凡肉眼可(kě)見(jiàn)的(de)凝集，不(bù)論凝σ→®₹集強度如(rú)何，均判為(wèi)陽性反應；
陰性反應：無凝集物(wù)可(kě)見(jiàn)或在溶液中出現 ¥(xiàn)點狀紅(hóng)色顆粒，搖動時(shí)均勻分(fēn)散無凝集↔✘，判為(wèi)陰性反應。
⑹注意事(shì)項：
a．試驗應在23℃~29℃條件(jiàn)下(xià)進行(xín₹δg)；
b．TRUST抗原久置易沉澱，使用(yòng)前應先搖←Ω勻；每盒試劑使用(yòng)前應用(yòng)陽性血清對(duì)照÷ε (zhào)驗證，結果異常時(shí)應停止使用(y↔β↑òng)。
c．抗原自(zì)冰箱取出後要(yào)于23℃~29℃✘"®←環境中平衡後再用(yòng)，抗原滴加前用(yδ↕↕'òng)滴管反複吹吸數(shù)次；
d．實驗時(shí)應防止其它病毒感染，卡₹♥片一(yī)次性使用(yòng)；
e．本試驗為(wèi)非特異性反應素試驗，可(kěε≤♠±)能(néng)出現(xiàn)生(shēng)物(wù)學假陽性，見§♣©(jiàn)表1；
f．本試驗為(wèi)初篩試驗，結果陽性時(shí)，應重複試驗，重複結果仍為&↕ (wèi)陽性，應進行(xíng)确認試驗（Tα εPHA和(hé)TPPA試驗），并将初篩試®&↓₹驗結果與确認試驗結果一(yī)并報(bào)告主檢醫(yī)生( ≈shēng)。
g．每次實驗時(shí)，應附梅毒（初篩）臨界濃εε☆★度（2NCU/ml）質控品，保證檢驗質量。
h．檢驗報(bào)告單應有(yǒu)檢驗者及審核× σ者簽署姓名，檢驗結果應做(zuò)好(hǎo)登記""÷φ，以備查核。
i．檢驗後的(de)樣品血清或血漿應做(zuò)好(hǎo)唯一(yī)标≠識，置-20℃以下(xià)冰箱保存6個(gè)月(yuè)。
j．檢驗操作(zuò)時(shí)實驗人(r☆λ₹én)員(yuán)應戴手套；實驗後廢物(wù)應按有(yǒu)關規定處理(β←lǐ)，切勿随意丢棄。
k．本試驗可(kě)能(néng)存在“前帶現(xiàn)象”，如( ☆€rú)遇弱陽性樣本或可(kě)疑樣本應進一(yī)₽↑步做(zuò)定量試驗，如(rú)血清稀釋後，反應不φΩ∏(bù)增強，判為(wèi)陰性，反之報(bào)告$陽性。
3．臨床意義：見(jiàn)表2。
表1 生(shēng)物(wù)學假陽性疾病的(de)分(fēn&↓≤)類及發生(shēng)率
類别 | 病名 | 陽性率（100%） |
急性傳染病 | 瘧疾 | 100 |
| 斑疹傷寒 | 20 |
| 牛痘 | 20 |
| 回歸熱(rè) | 30 |
| 猩紅(hóng)熱(rè) | 20 |
| 巨細胞病毒肺炎 | 20 |
慢(màn)性傳染病 | 麻風(fēng) | 60 |
| 性病性淋巴肉芽腫 | 20 |
| 乙型肝炎 | 10 |
其它 | 系統性紅(hóng)斑狼瘡 | 20 |
表2梅毒抗體(tǐ)臨床意義
RPR/TRUST | TPHA/TPPA | 臨床意義 |
— | — | 排除梅毒或初期感染（潛伏期） |
+ | — | 假陽性或初期感染 |
— | + | 梅毒治療或晚期梅毒 |
+ | + | 梅毒感染 |
HIV 抗 體(tǐ) 檢 測
一(yī)、HIV抗體(tǐ)的(de)檢測：本次征兵(bīng)體(tǐ)檢是(shì)使用(yò₹♣ng)上(shàng)海(hǎi)科(kē)華公司雙φΩα抗原夾心法（兩步法）試驗盒。此項體(tǐ)>¶檢要(yào)求對(duì)定兵(bīng)後的(α₹de)兵(bīng)員(yuán)進行(xíng)。
1．原理(lǐ)：采用(yòng)HIV特異性抗原g≥↓§p160和(hé)gp36等包被微(wēi)孔反應闆，∏ 用(yòng)gp36、gp41标記辣根過氧化(huà)物(wù)酶。當待測标 Ω∏δ本中存在HIV抗體(tǐ)時(shí)，該抗Ω♣✔↔體(tǐ)與固相(xiàng)化(huà)的₹(de)抗原結合于反應闆上(shàng)，并進一(yī✔Ω)步與酶結合物(wù)相(xiàng)結合，在TMB底物(wù)參與反應的(de)情況下(xià)©∏γ，産生(shēng)顯色反應。
2．操作(zuò)步驟：
⑴平衡：将試劑盒平衡至室溫，酶标闆須室溫平衡後，方可(kě↓γ)開(kāi)封，餘者連同幹燥劑即時(shí)封存。•∏∞≤
⑵配液：PBST濃縮液用(yòng)蒸餾水(shuǐ)₽→↔∞或去(qù)離(lí)子(zǐ)水(shuλǐ)1:25稀釋使用(yòng)。
⑶編号：取所需數(shù)量微(wēi)孔闆✘★≈♦條固定于支架上(shàng)，按序編号。
⑷加樣：按順序分(fēn)别在相(xià≥§"ng)應孔加入100μl待測樣本。每塊微(wēi)孔闆應設陰性2孔，每孔100₽≠±μl；陽性對(duì)照(zhào)3孔、每孔100μl；空(kōng)白(•∞€bái)對(duì)照(zhào)2孔（不(bù)加 φ↑≤樣本和(hé)酶結合物(wù)）、室內(€×nèi)質控1孔，加量100μl。
⑸溫育：覆蓋粘膠紙(zhǐ)封闆後置37℃溫育60分(fēn)鐘(zh∞δφōng)。
⑹洗滌：小(xiǎo)心将粘膠紙(zhǐ)揭掉，吸幹闆內(nèi)液體(tǐ)∑✘♦，将洗滌液注滿每孔（約300μl）充分(fēn)× "洗滌5遍，最後一(yī)次在幹淨紗布上(shàng)盡量扣幹。
⑺加酶：每孔加入酶标試劑100μl，空(kōng)白←↔π£(bái)孔除外(wài)。
⑻溫育：用(yòng)粘膠紙(zhǐ)封闆後置37℃溫育30分(f¥§♥ēn)鐘(zhōng)。
⑼洗滌：同步驟⑹。
⑽顯色：每孔加底物(wù)緩沖液50μl、TMB 50μl，混勻， '37℃顯色10分(fēn)鐘(zhōng)。
⑾終止：每孔入終止液50μl，輕拍(pāi)混勻。
⑿測定：用(yòng)酶标儀單波長(cháng)450nm或雙₩↔波長(cháng)450nm/630nm（用(yòng)單波長(cháng)測£↔±定時(shí)，以空(kōng)白(bái)對(duì)♥¥照(zhào)孔調零），讀(dú)取每孔₽©≥吸收值（加終止液後，務必15分(fēn)鐘(z¶ ↓£hōng)內(nèi)讀(dú)數(shù)完畢）。
3．結果判斷
抗HIV陽性對(duì)照(zhào)值＞0.8，抗HIV陰性對(duδ §ì)照(zhào)值＜0.08。
臨界值(C.0.)=陽性對(duì)照(zhào)值 ≠×10%（若陽性對(duì)照(zhào)值＞2.5按2.5計(jì)算(s₹&uàn)）。
結果判定： 樣本OD值≤臨界值(C.0.)者為(wèi)HIV抗體(tǐ)陰&$•™性；
樣本OD值＞臨界值(C.0.)者為(wèi)↕☆×HIV抗體(tǐ)陰性
注意：初試陽性者應重新取樣雙孔複試，複試陽性者應按“全國(guó)HI₩ V檢測管理(lǐ)規範”，送HIV确認實驗室進行(xíng)确↔•認試驗！
4．注意事(shì)項：
⑴本試劑的(de)使用(yòng)單位必須是(shì)當地(dìφ©)衛生(shēng)行(xíng)政部門(mén)批準的(¶¶≠de)HIV初篩實驗室。
⑵必須符合HIV實驗室管理(lǐ)規範和(hé)生(shēng)物(wù)安≈∏♠→全守則的(de)規定，嚴格防止交叉感染，檢驗操作(zuò©←)時(shí)實驗人(rén)員(yuán)應戴手套，穿工(gōng→γ)作(zuò)衣，嚴格執行(xíng)消毒隔離(lí)制(zhì•×)度，實驗後廢物(wù)及廢液應按有(yǒu)'↔&關規定處理(lǐ)，切勿随意丢棄、排放(fàng)。
⑶HIV抗體(tǐ)結果的(de)判定必<§β須以酶标儀讀(dú)數(shù)為(wèi)準。
⑷标本和(hé)酶結合物(wù)均應用(yòng)加樣器(q∞♥>ì)加注，并經常對(duì)其準确性。
⑸酶标闆須密封防潮，從(cóng)冷(lěng)藏環境中取出時(shí)♠↕，應置室溫平衡至潮氣盡幹後方可(kě)開(kāi)封啓用(y↔§òng)。餘者并幹燥劑即時(shí)放(fàng∑£Ω)入自(zì)封袋中保存。
⑹加試劑前，應先将瓶子(zǐ)翻轉數(shù)次，使液體(tǐ)混勻。
⑺洗滌時(shí)各孔均須加滿，防止孔口內(nèi)有(yǒu)遊離$✔(lí)酶未能(néng)洗淨，每遍洗滌浸 ★泡時(shí)間(jiān)為(wèi)30秒(miǎo£ ♥)～60秒(miǎo)。
⑻每次實驗時(shí)，應附HIV臨界濃度（2NCσ≠♠≈U/ml）質控品，保證檢驗靈敏度。
⑼本試驗為(wèi)初篩試驗，結果陽性時♦Ω ₹(shí)，應重複試驗，重複結果仍為(wèi)陽性，應送HIV确認實驗室進行(xíng)确認試驗！
⑽封闆膜為(wèi)一(yī)次性用(yòng)品，不(§ ®♥bù)能(néng)重複使用(yòng)。
⑽檢驗報(bào)告單應有(yǒu)檢驗者及審核者簽署姓名，檢驗↔∞結果應做(zuò)好(hǎo)登記，并附酶标儀打印原始記錄，以備查核♣ ∏。
⑾檢驗後的(de)樣品血清或血漿應做(zuò)好(hǎo)唯一(y↓>ī)标識，置-20℃以下(xià)冰箱保存6個(✘"↑gè)月(yuè)。
5．臨床意義：
本試驗為(wèi)初篩試驗，所以本試驗結果陽性者，必須再做(αεπ₹zuò)HIV抗體(tǐ)确認試驗，最終以确認試驗結果作(zuò)為(w β≈✔èi)HIV感染的(de)依據。
血清丙氨酸氨基轉移酶速率法
标準操作(zuò)程序及注意事(shì)項
福州市第一醫院體檢中心 王友(yǒu)基
一(yī)．标準操作(zuò)程序
1實驗原理(lǐ)和(hé)檢驗目的(de♠₹)
本試劑用(yòng)于測定人(rén)血清中丙氨酸氨 ☆↕←基轉移酶的(de)酶活濃度。
L-丙氨酸 +α-酮戊二酸 ALT 丙酮酸 + L-谷氨酸
丙酮酸 + NADH + H+ LDH L-乳酸 + NAD+ + H2O
在340納米處測定NADH吸光(guāng)度的(de)下(×₹∞εxià)降速率，可(kě)計(jì)算(suàn)出ALT的(dγ>βe)活力。
2标本采集和(hé)處理(lǐ)
标本：新鮮無溶血血清。
受檢者（體(tǐ)檢對(duì)象）的(de)準備：對(d♦λσuì)于體(tǐ)檢對(duì)象抽血前應有(yǒu)2周時(shí)α↔$★間(jiān)保持平時(shí)的(de)飲食習(x'×"í)慣。
靜(jìng)脈采血：體(tǐ)位影(yǐng λ ∑)響水(shuǐ)分(fēn)在血管內(nèi)外(wà∞©¶πi)的(de)分(fēn)布，一(yī)般在采血時(sh εí)取坐(zuò)位。
标本要(yào)放(fàng)在帶蓋的(de)≤↔αΩ容器(qì)內(nèi)以防污染和(hé)蒸∏₩發，要(yào)求是(shì)新鮮無溶血的(de)血清，樣∞↓↕品采集後要(yào)及時(shí)離(lí)心标本，吸出血清,并立∏↕↕即檢測，處理(lǐ)樣品時(shí)要(yào)将其當成Ωα↔生(shēng)物(wù)污染品。
試劑 | 主 要(yào) 成 分(fēn) | 實驗濃度 |
R1 | L-丙氨酸 乳酸脫氫酶（LDH） | 500mmol/L ≥5000U/L |
R2 | NADH α-酮戊二酸 | 0.18mmol/L 15mmol/L |
包裝規格： 有(yǒu)以下(xià)幾種：
R1：80ml×2；R2：20ml×2
試劑為(wèi)液體(tǐ)雙試劑，開(kā×δ i)瓶即可(kě)使用(yòng)，用(yònλΩπg)後及時(shí)置于2～8℃避光(g♣φuāng)保存。
3.3試劑穩定性
原裝試劑在2～8℃避光(guāng)保存，穩定期12個(gè)月(yu豕γ↓)，試劑開(kāi)瓶載機(jī)2～8"δ℃穩定30天。
新打開(kāi)試劑不(bù)宜與已用(yòn↑ g)過的(de)試劑混合在一(yī)起,否則易造成試劑穩定性下(xià)降。∞γ☆£
4校(xiào)準
每日(rì)進行(xíng)試劑空(kōng)¥♦ 白(bái)校(xiào)準操作(zuò)，β<₽用(yòng)蒸溜水(shuǐ)當作(zuò)樣本進行(×∞xíng)檢測。
推薦校(xiào)準周期為(wèi)30天一(yī)輪，當∞•試劑批号更換時(shí)應重新校(xiào)準。
應采用(yòng)省臨床檢驗中心配發的(de) （正常範圍質控）和(hé) （€¥÷病理(lǐ)範圍質控）兩個(gè)水(shuǐ)平的(de)血清¶♣α進行(xíng)室內(nèi)質控。
質控物(wù)的(de)檢測值應在給定質控範圍，及通(tōng¥ ≈)過參加省臨床檢驗中心室間(jiān)質評對(duì)₹ 實驗室的(de)運作(zuò)情況進行( Ω↑xíng)系統評價。
每日(rì)進行(xíng)樣本檢測之前首先應進行(xíng)質控操作β♠ ♠(zuò)，以考察檢測系統的(de)在控情況。如(rú)果檢測結果λ←∏符合質控要(yào)求則進行(xíng)樣本操作(zuò ₽↔♥)；如(rú)果不(bù)符合質控要(yào)求，則應重複質控操作(zuγφλò)，以排除可(kě)能(néng)發生(s€σhēng)的(de)偶然誤差；如(rú)果仍不(σ≈÷←bù)符合質控要(yào)求，則應考慮質控品的(de)重新準備、試劑的(de)¥↓£重新校(xiào)準或更新、儀器(qì)的(de)維護等∑∑✘，建議(yì)在樣本的(de)檢測過程中λ$€π和(hé)/或結束後再次進行(xíng)質控操φ☆£作(zuò)，以考察樣本的(de)檢測全過程的(de)在控情況。
6操作(zuò)
6.1參數(shù)設定: 使用(yòng)單位根據→Ωα<所用(yòng)生(shēng)化(huà)分(fēn)析儀機(jī)™σδλ型的(de)與其相(xiàng)匹配試劑的→₽(de)參數(shù)進行(xíng)驗✘證或自(zì)行(xíng)設置。
6.2儀器(qì)運行(xíng)：根據各單位各自(zì)所用(yòng<≠±)生(shēng)化(huà)分(fēn)析儀的(de)标準運↓≥行(xíng)步驟進行(xíng)操作(zuò) γ$₽。
7計(jì)算(suàn)方法
ALT (U/L)＝(△A樣品/分(fēn)－△A空(kōn ↔g)白(bái)/分(fēn))×K
γ¶" Vt&n•↕≈bsp; &n∏£bsp; &™∏∑nbsp;
K = &nbsβ ←p; βλ ×1000
&nb÷♠↕sp;Vs×消光(guāng)系數(shù) → &nb♣ sp;
Vt = 反應總體(tǐ)積 Vs = €∏樣品體(tǐ)積
8參考區(qū)間(jiān)
男(nán)：≤40U/L
女(nǚ)：≤40U/L
9結果處理(lǐ)
對(duì)超出可(kě)報(bào)告範圍的(de)φσ←結果的(de)處理(lǐ)：當△A/分(fēn)大(dà)于0.190時(≠→₹♦shí)，樣品用(yòng)生(shēng)∏>≥理(lǐ)鹽水(shuǐ)稀釋後重新測定，結果乘以稀釋倍數(shù)。
對(duì)檢驗結果為(wèi)病危報(bào)警值的(de)處理(lǐ)：應×∏™立即報(bào)告。
二．注意事(shì)項
1 方法局限性
試劑抗幹擾能(néng)力：
當血清中抗壞血酸≤25mg/dl、血紅(hóng)蛋白(bái)σ"≤200 mg/dl（使用(yòng)血紅♣♥(hóng)蛋白(bái)純品，非紅(hóng)細< ¥胞裂解液）、總膽紅(hóng)素≤40 mg/dl、結合膽₽♠'紅(hóng)素≤40 mg/dl時(shí)，對(duì)測定無明(mí>♣ng)顯幹擾。
2操作(zuò)注意事(shì)項
(1)試劑空(kōng)白(bái)吸光(guāng)≈∑度小(xiǎo)于1.000時(shí)，勿用(yòng™€ )。
(2)本産品僅用(yòng)于體(tǐ)外(wài)÷≠'診斷，內(nèi)含防腐劑，避免直接接觸皮膚和(h☆®é)眼睛，切勿吞咽。
(3)本産品應在2～8℃條件(jiàn)下(xià)貯存。
3操作(zuò)性能(néng)
選用(yòng)三組血清進行(xíng)批內(nèi)精密度和(hé¥↓★)日(rì)間(jiān)精密度的(de)檢測∞<，：批內(nèi)精密度和(hé)日(rì)間(jiān)♣₽'&精密度
3.3方法學比較
均符合要(yào)求。
三、征兵(bīng)體(tǐ)檢對(duì)血清丙氨酸氨基轉移酶速率↕↓ ←法檢測的(de)項目要(yào)求：
1．要(yào)做(zuò)好(hǎo)室內(nè♥ ™≈i)質控，質控血清檢測結果應符合要(yào)求，否則應Ω§₽β重新檢測.
2.應注意結果異常樣本複檢，防止由于污染或錯(cuò)誤操作(zuò)造成的∏∏(de)假誤差。
3．每次實驗報(bào)告單應簽上(shàng)操作(zuò©φ)者姓名，結果應填報(bào)具體(tǐ)檢測結果，不(bù)得(↕αde)填寫正常或異常。應做(zuò)好(↔&αhǎo)結果登記，檢驗結果應專門(mén)登記，并附有(yǒu)各種記錄。
4．檢測後的(de)血清樣本應留樣6個(gè)月(yuè☆↕±)。
5．應每天觀察儀器(qì)操作(zuò)間(jiān)的(de)溫÷≠濕度和(hé)試劑存放(fàng)冰箱的(de)溫度是(s©©αhì)否在要(yào)求範圍。
有(yǒu)關使用(yòng)技(jì)術(shù)請(qǐ±π£§ng)與省臨床檢驗中心聯系。
五．注意事(shì)項
1．使用(yòng)貝克曼全自(zì)動生(shēng)©↓化(huà)分(fēn)析儀的(de)參檢單位，請(qǐng)使用(yòng)§α統配的(de)廣州标佳貝克曼專用(yòng)試劑，按儀器(qìσ₽<)技(jì)術(shù)操作(zuò)規範，直接上(shàng)機(j ∞ ī)檢測。
2．使用(yòng)德靈全自(zì)動生(shēng)化(huà ★φ )分(fēn)析儀的(de)參檢單位，請(qǐng)使用(yòng)本單位現(₽™$xiàn)用(yòng)的(de)德靈專機(≥♥jī)專用(yòng)試劑檢測，不(bù)另外σ≠$(wài)配發試劑。
